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抑菌(jūn)圈檢測方法(fǎ)解(jiě)析(xī)
更(gēng)新(xīn)時間:2025-02-13
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抑(yì)菌圈檢(jiǎn)測是利用(yòng)待測抗菌物(wù)質在(zài)瓊(qióng)脂平板上(shàng)的(dí)擴(kuò)散作(zuò)用,使(shǐ)其周圍的細菌(jūn)生長受到(dào)抑製,從而(ér)形成(chéng)透明的抑菌(jūn)圈(quān)。抑菌圈的(dí)大小通(tōng)常(cháng)被(bèi)用來(lái)判定(dìng)待測物質(zhì)的抑菌(jūn)效價,即(jí)其(qí)抑製(zhì)細(xì)菌生(shēng)長的能力(lì)。
抑(yì)菌圈(quān)檢測方(fāng)法(fǎ)解(jiě)析(xī)
抑菌圈(quān)檢(jiǎn)測(cè)方(fāng)法步驟
(1)準(zhǔn)備材料及用具
培養(yǎng)皿,無菌(jūn)吸管或針(zhēn)筒,圓(yuán)片濾紙(zhǐ),帶玻璃(lí)珠的無菌(jūn)水,帶過濾漏鬥的三(sān)角板(bǎn),鑷(niè)子,接種針(環),熔化(huà)狀(zhuàng)態的瓊脂培養基,一(yī)定(dìng)濃(nóng)度(dù)的藥(yào)劑(jì)以及要測試(shì)的(dí)菌種。
還(huán)可(kě)以準備(bèi)打(dǎ)孔器,牛津(jīn)杯,不鏽(xiù)鋼(gāng)圓(yuán)管等器(qì)皿及用品。
(2)製備菌懸(xuán)液(yè)
從純培養物或臨床樣本中獲取(qǔ)細菌,並使用適當(dāng)的培養(yǎng)基培養(yǎng)至(zhì)對(duì)數生長期(qī)。
用(yòng)無(wú)菌(jūn)生(shēng)理鹽水(shuǐ)或(huò)其(qí)他稀釋液將(jiāng)細(xì)菌(jūn)製(zhì)備成(chéng)一定濃度的(dí)菌(jūn)懸(xuán)液,通(tōng)常為0.5麥氏比濁(zhuó)單(dān)位(相當(dāng)於(yú)1x10^8CFU/mL)。
(3)接種平板
將菌(jūn)懸(xuán)液均匀(yún)塗布在含(hán)有固態培養(yǎng)基的(dí)平板(bǎn)上,如Mueller-Hinton瓊(qióng)脂(zhī),確保平(píng)板(bǎn)表麵覆(fù)蓋且(qiě)細菌分布均匀(yún)。
也可(kě)以(yǐ)采(cǎi)用傾(qīng)注(zhù)平(píng)板法或預加菌液傾(qīng)注平板法(fǎ)製(zhì)備試驗平(píng)板。
(4)放置抑菌劑(jì)
如果是(shì)使用(yòng)擴散法(fǎ)(如牛津(jīn)杯(bēi)法),在(zài)平(píng)板(bǎn)上放(fàng)置(zhì)含(hán)有固定(dìng)濃(nóng)度抑(yì)菌劑的(dí)紙片或圓片(piàn)濾紙(zhǐ)(事(shì)先(xiān)在不同(tóng)濃度(dù)的抑菌劑中(zhōng)浸漬片(piàn)刻)。
如果(guǒ)是使用(yòng)其(qí)他(tā)方法,如微量(liáng)稀(xī)釋法(fǎ)或宏量(liáng)稀(xī)釋(shì)法,則(zé)在平板(bǎn)上或試管中加入不(bù)同濃(nóng)度(dù)的(dí)抑(yì)菌劑溶液(yè)。
(5)培養
將(jiāng)接種好的平板放入(rù)恒溫(wēn)培(péi)養(yǎng)箱(xiāng)中,在(zài)推(tuī)薦(jiàn)的溫度下(通常為(wéi)35-37°C)培(péi)養(yǎng)一定時間(通常為16-24小(xiǎo)時)。
(6)讀(dú)取結果(guǒ)
培(péi)養結(jié)束後,觀(guān)察抑(yì)菌劑紙片(piàn)或(huò)圓片濾(lǜ)紙周圍(wéi)的(dí)抑菌(jūn)圈(quān)大(dà)小。
使(shǐ)用尺子(zǐ)測量(liáng)抑(yì)菌圈(quān)直徑,以確(què)定細(xì)菌對抑菌劑的敏(mǐn)感性。
(7)數(shù)據(jù)處理(lǐ)
對(duì)照樣品(pǐn)應(yīng)無(wú)抑(yì)菌(jūn)圈產生,否則抑(yì)菌圈(quān)試(shì)驗(yàn)無效(xiào)。
抑菌圈數值可以取多(duō)個(gè)樣品(pǐn)的平均(jūn)值(zhí),並保留有(yǒu)效數(shù)字(zì)。
抑菌圈(quān)結(jié)果判定標(biāo)準
抑(yì)菌圈結(jié)果(guǒ)判定標(biāo)準主要依據(jù)抑菌(jūn)圈(quān)直徑的(dí)大小來判斷細(xì)菌的(dí)敏(mǐn)感性或(huò)抑菌(jūn)物(wù)質的抑(yì)菌效(xiào)果。
具(jù)體而言,抑菌(jūn)圈(quān)直徑的大小反(fǎn)映(yìng)了抑(yì)菌劑或(huò)藥物對微生(shēng)物(wù)的(dí)抑(yì)製(zhì)作用強(qiáng)弱(ruò)。一般(bān)情(qíng)況(kuàng)下(xià),抑菌圈(quān)直(zhí)徑判斷(duàn)標(biāo)準(zhǔn)值(zhí)的(dí)具(jù)體區(qū)間(jiān)為(wéi)15-30mm1.
不同(tóng)的(dí)抑(yì)菌(jūn)物(wù)質其(qí)抑(yì)菌效果(guǒ)有(yǒu)所差(chà)異,直(zhí)徑(jìng)較大通常(cháng)意(yì)味著(zhuó)該(gāi)物質(zhì)對(duì)細菌(jūn)的抑製作用(yòng)較(jiào)強(qiáng),能在較大(dà)範(fàn)圍(wéi)內阻(zǔ)止(zhǐ)細菌(jūn)的(dí)生(shēng)長(cháng)繁殖;而(ér)直徑(jìng)較(jiào)小(xiǎo)則表(biǎo)示(shì)抑(yì)製(zhì)效果相對(duì)較弱(ruò),可(kě)能需要更(gēng)高(gāo)濃(nóng)度(dù)或(huò)更有效(xiào)的(dí)物(wù)質(zhì)才能達到(dào)理(lǐ)想(xiǎng)的抑菌(jūn)效(xiào)果(guǒ)。
抑菌圈檢(jiǎn)測方法解析(xī)






