卸妝油皮膚(fū)刺激性斑(bān)貼(tiē)試驗技(jì)術規範：從(cóng)動物(wù)模型(xíng)到(dào)人體評價的全流(liú)程(chéng)風(fēng)險(xiǎn)評估

一
，試驗設計(jì)與(yǔ)受試(shì)物(wù)製備(bèi)

（一(yī)）受試物濃度與對(duì)照組設(shè)置

受試(shì)物處理(lǐ)：

1.原(yuán)液組：未(wèi)稀(xī)釋卸妝(zhuāng)油(yóu)（含(hán)油脂
，表麵活(huó)性(xìng)劑(jì)及防(fáng)腐劑(jì)）；

2.稀(xī)釋組(zǔ)：50%卸(xiè)妝(zhuāng)油(yóu)（去離(lí)子水按1:1體(tǐ)積比稀釋(shì)）
，評估濃度(dù)依(yī)賴(lài)性刺激；

3.陽(yáng)性(xìng)對照：0.5%十(shí)二烷(wán)基*（SDS）水溶液(yè)（已(yǐ)知中(zhōng)度(dù)刺(cì)激(jī)）；

4.陰(yīn)性(xìng)對(duì)照：去(qù)離(lí)子水(shuǐ)（無刺激(jī)性(xìng)）12。

賦(fù)形(xíng)劑(jì)與(yǔ)貼(tiē)片(piàn)選擇：

1.貼片類型：無(wú)紡布(bù)圓形貼(tiē)片（直徑8 mm
，麵積0.5 cm²）
，每片(piàn)負載0.2 mL受(shòu)試物；

2.固定方(fāng)式(shì)：低(dī)致(zhì)敏醫用(yòng)膠帶（3M Micropore）
，避免(miǎn)膠(jiāo)帶(dài)直接(jiē)接觸皮(pí)膚引(yǐn)發刺(cì)激(jī)；

3.封(fēng)閉性：使用鋁(lǚ)箔覆蓋(gài)貼(tiē)片(piàn)（封閉式斑貼）
，確保受(shòu)試(shì)物與(yǔ)皮膚(fū)充(chōng)分接(jiē)觸3。

（二）動物模(mó)型(xíng)與人體(tǐ)誌願者(zhě)選擇

動物(wù)模(mó)型：

1.物種：新(xīn)西蘭(lán)白兔（雌(cí)性(xìng)
，體(tǐ)重(zhòng)2.0-2.5 kg）
，每(měi)組3隻(zhī)；

2.皮(pí)膚準(zhǔn)備：背部脫(tuō)毛(máo)（麵(miàn)積5 cm×10 cm）
，脫毛後24小時檢(jiǎn)查皮膚完整性（無劃(huá)痕
，紅(hóng)斑(bān)）；

3.適(shì)應(yīng)期(qī)：實驗室(shì)環境(jìng)適應(yīng)5天(tiān)（溫度23±2℃
，濕(shī)度(dù)50±10%）4。

1.納(nà)入(rù)標(biāo)準(zhǔn)：18-65歲健康成(chéng)人
，皮膚類型Ⅰ-Ⅳ型（Fitzpatrick分類）
，近(jìn)3個(gè)月未使(shǐ)用糖皮(pí)質激(jī)素(sù)；

2.排(pái)除(chú)標準：敏感(gǎn)肌
，特應(yīng)性皮炎(yán)史
，妊娠哺乳期(qī)女性(xìng)
，樣(yàng)本(běn)量≥20人(rén)（滿足(zú)統(tǒng)計學要(yào)求）5。

二
，標(biāo)準操作流(liú)程與觀(guān)察指(zhǐ)標

（一(yī)）動物斑(bān)貼(tiē)試(shì)驗(yàn)步(bù)驟

貼片施(shī)加：

1.每(měi)隻(zhī)兔(tù)背部(bù)對(duì)稱放(fàng)置4個貼片（原液(yè)
，稀釋液
，陽性(xìng)對(duì)照(zhào)
，陰性(xìng)對照(zhào)）
，間距(jù)≥2 cm；

2.輕(qīng)壓貼片確(què)保(bǎo)無(wú)氣(qì)泡(pào)
，使(shǐ)用(yòng)彈性(xìng)繃帶(dài)固(gù)定
，防止動物(wù)抓撓。

暴(bào)露(lòu)與移(yí)除(chú)：

1.暴(bào)露(lòu)時(shí)間(jiān)：24小(xiǎo)時(shí)；

2.移除後處(chǔ)理：用(yòng)溫(wēn)水(shuǐ)輕柔(róu)清洗殘(cán)留受試(shì)物(wù)
，避免摩擦(cā)刺激(jī)；

3.觀(guān)察時間點(diǎn)：移除(chú)後30分(fēn)鐘(zhōng)（急性反應(yīng)）
，24小時
，48小時
，72小(xiǎo)時（延遲(chí)反應）2。

（二）Draize評分(fēn)體(tǐ)係

反(fǎn)應(yīng)類(lèi)型評分(fēn)標(biāo)準（動物模型(xíng)）評(píng)分標(biāo)準（人體(tǐ)模(mó)型）

紅斑(bān)無（0）
，輕(qīng)微可見(jiàn)（1）
，中(zhōng)度(dù)（2）
，重度(dù)（3）
，焦痂（4）無(wú)（0）
，輕微(wēi)（1）
，明顯（2）
，重度（3）

水(shuǐ)腫無（0）
，輕(qīng)微（1）
，中(zhōng)度（2）
，重(zhòng)度（3）無（0）
，輕微（1）
，明顯（2）
，重度(dù)（3）

總(zǒng)分紅(hóng)斑分+水(shuǐ)腫分（最高(gāo)7分(fēn)）原發性刺激(jī)指數（PSI）=（紅斑發(fā)生率(shuài)+水腫發生率(shuài)）/2

（三(sān)）人(rén)體(tǐ)斑貼特(tè)殊(shū)觀察(chá)指(zhǐ)標

1.主觀(guān)症(zhèng)狀(zhuàng)：瘙癢
，灼(zhuó)熱(rè)感（視覺模(mó)擬評(píng)分(fēn)法(fǎ)VAS 0-10分）；

2.皮(pí)膚反(fǎn)應持(chí)續時間：記(jì)錄紅斑(bān)/水(shuǐ)腫(zhǒng)消退時(shí)間
，超過72小時提示(shì)潛(qián)在(zài)慢(màn)性刺(cì)激；

3.重(zhòng)復激(jī)發試驗：對(duì)弱陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)（PSI 0.5-1.9）者
，2周後再次貼片確認反(fǎn)應(yīng)重(zhòng)現(xiàn)性(xìng)5。

三(sān)
，結果判(pàn)定(dìng)與(yǔ)風(fēng)險分級(jí)

（一(yī)）刺激強度(dù)分(fēn)級標準(zhǔn)

動物試驗(yàn)總分（Draize）人體PSI值(zhí)刺激(jī)強度風險等級(jí)

0-0.4＜0.5無刺激(jī)低風險(xiǎn)

0.5-1.90.5-1.9輕度(dù)刺激中風(fēng)險(xiǎn)

2.0-4.92.0-3.9中(zhōng)度(dù)刺(cì)激(jī)高風(fēng)險(xiǎn)

≥5.0≥4.0重度(dù)刺激ji高(gāo)風(fēng)險

（二(èr)）體外替代試(shì)驗驗證

EpiDerm™重(zhòng)組(zǔ)人(rén)表(biǎo)皮(pí)模型：

1.操作(zuò)步驟(zhòu)：受試物暴露15分鐘(zhōng)→PBS清洗→MTT染色→檢(jiǎn)測570 nm吸(xī)光(guāng)度(dù)；

2.判(pàn)定(dìng)標(biāo)準(zhǔn)：相對(duì)細(xì)胞(bāo)活力≥50%為無刺激
，與(yǔ)動物試驗結果一致性85%6。

3D皮膚模(mó)型(xíng)優(yōu)勢(shì)：

無需(xū)動(dòng)物倫理(lǐ)審批(pī)
，試驗(yàn)周期縮(suō)短(duǎn)至48小時(shí)
，可(kě)評估香精
，防腐劑等(děng)成分(fēn)的(dí)協(xié)同(tóng)刺激(jī)作用7。

四
，影響因素與試驗優化

（一(yī)）關(guān)鍵影響因素

1.皮膚完(wán)整性：動物(wù)脫(tuō)毛時(shí)避(bì)免(miǎn)刮(guā)傷(shāng)（可采(cǎi)用化(huà)學(xué)脫(tuō)毛(máo)劑硫化鈉(nà)
，濃度(dù)8%）；

2.貼片停留(liú)時(shí)間：人體模(mó)型(xíng)48小(xiǎo)時暴露(lòu)比24小(xiǎo)時(shí)更易檢出(chū)延遲性(xìng)刺激（如(rú)甲醛釋(shì)放體）；

3.環境濕(shī)度：高濕度（＞60%）可能增(zēng)強(qiáng)水溶(róng)性(xìng)成分的滲透(tòu)
，建議控製(zhì)在(zài)50±5%3。

（二(èr)）配方優化建議

刺(cì)激性成分(fēn)替(tì)代：用苯氧(yǎng)乙(yǐ)醇(chún)（≤1%）替(tì)代(dài)甲基(jī)異噻唑啉酮
，降低(dī)防腐(fǔ)劑刺(cì)激風(fēng)險(xiǎn)；

油(yóu)脂體係調(tiáo)整(zhěng)：增(zēng)加(jiā)霍(huò)霍巴(bā)油(yóu)（20%-30%）可緩解表(biǎo)麵活性(xìng)劑(jì)對(duì)皮膚(fū)屏(píng)障(zhàng)的破壞；

pH值控製：調節至5.5-7.0（接(jiē)近皮膚pH）
，減(jiǎn)少(shǎo)酸鹼(jiǎn)刺激(jī)1。

五
，法規(guī)要求(qiú)與(yǔ)報(bào)告撰寫(xiě)

（一）法(fǎ)規依據

中國(guó)：《化(huà)妝品安全技術規(guī)範》（2022年(nián)版(bǎn)）第(dì)四章皮膚(fū)刺(cì)激性(xìng)/腐蝕(shí)性(xìng)試驗；

歐(ōu)盟：EC 1223/2009法(fǎ)規
，要求對新(xīn)原料(liào)進行(háng)體外替代試(shì)驗；

美(měi)國：FDA化(huà)妝(zhuāng)品自願注(zhù)冊計劃（VCRP）

（二）報告(gào)核(hé)心內容

1.受(shòu)試物(wù)信(xìn)息（成分
，濃(nóng)度(dù)
，批號(hào)）；

2.試(shì)驗(yàn)設(shè)計（模型(xíng)選(xuǎn)擇
，樣(yàng)本(běn)量(liáng)
，對照組(zǔ)）；

3.原始數(shù)據(jù)（紅斑(bān)/水腫照片(piàn)
，評分記(jì)錄）；

4.結論與(yǔ)建(jiàn)議(yì)（如(rú)“本(běn)品為輕度(dù)刺激
，建(jiàn)議(yì)添加(jiā)舒緩成分"）。

關鍵(jiàn)詞：卸(xiè)妝(zhuāng)油；皮膚(fū)刺(cì)激性(xìng)；斑貼(tiē)試(shì)驗；Draize評(píng)分(fēn)；重組(zǔ)人(rén)表皮模(mó)型

參考文(wén)獻(xiàn)

[1] 《化妝(zhuāng)品安全技術(shù)規範(fàn)》（2022年版）[S]. 國(guó)家藥(yào)監局.

[2] OECD Test No. 404 皮膚刺(cì)激(jī)性/腐蝕性試(shì)驗[S]. 2015.

[3] SCCS Guidance on Dermal Irritation Testing[S]. 2021.