抗病毒活性(xìng)試驗是將病毒(dú)分別(bié)接種在(zài)試樣(yàng)和(hé)對(duì)照(zhào)樣上(shàng)，在特(tè)定(dìng)的接觸(chù)時間(jiān)後，計數剩(shèng)餘(yú)的感染(rǎn)性病毒(dú)數(shù)量(病毒感染滴度)，以抗(kàng)病(bìng)毒(dú)試樣和(hé)對照樣試樣中剩餘(yú)感(gǎn)染(rǎn)性(xìng)病毒的平均(jūn)對數值(zhí)的(dí)差值作(zuò)為病(bìng)毒減少值，或以(yǐ)抗病(bìng)毒試樣和(hé)對(duì)照樣(yàng)試(shì)樣中剩(shèng)餘感染性病毒數(shù)量(liáng)的(dí)平均值來(lái)計(jì)算病(bìng)毒減少率。病毒感染滴度采(cǎi)用(yòng)噬斑法或TCID50法測(cè)定。

抗病(bìng)毒(dú)活性試(shì)驗-國(guó)家(jiā)檢驗檢測中心

抗病(bìng)毒活(huó)性試驗(yàn)步(bù)驟(zhòu)

1，試樣準(zhǔn)備

所有試(shì)樣(yàng)均置(zhì)於帶(dài)蓋樣(yàng)品瓶中備(bèi)用。

如(rú)果將(jiāng)培養皿(mǐn)試(shì)驗條件下放(fàng)入培養(yǎng)箱(xiāng)時(shí)，能保持濕度(dù)穩定(通過(guò)在每個(gè)培(péi)養(yǎng)皿(mǐn)上蓋上(shàng)蓋子(zǐ))，則(zé)可(kě)在無(wú)菌培養皿(mǐn)中製備(bèi)試樣(yàng)。在(zài)進(jìn)行試(shì)驗之前，無(wú)菌(jūn)地將試(shì)樣轉移至無菌(jūn)瓶中。

2，試(shì)樣(yàng)接種(zhǒng)病(bìng)毒

對於吸水(shuǐ)性試樣，用微量移(yí)液器精準吸取0.2mL病(bìng)毒懸液(yè)多點接(jiē)種(zhǒng)至(zhì)樣品瓶(píng)中的試(shì)樣(yàng)上，然後用(yòng)瓶蓋密(mì)封(fēng)樣品(pǐn)瓶(píng)。

對(duì)於疏水性織物試(shì)樣(yàng)，用微(wēi)量移液(yè)器(qì)精準吸取 0.2mL病毒懸液(yè)多(duō)點接(jiē)種至50mmX50 mm的試(shì)樣(yàng)上，再(zài)用(yòng)另(lìng)一塊50mmX50mm的樣片覆蓋，使(shǐ)試樣抗病毒(dú)處(chǔ)理麵(miàn)與病(bìng)毒(dú)懸(xuán)液(yè)充分接觸(chù)。對於(yú)疏水性纖維或紗(shā)綫(xiàn)試樣(yàng)，用(yòng)微(wēi)量移液器(qì)精準(zhǔn)吸取0.2mL病毒懸(xuán)液多點接種至50mmX50mm的(dí)試樣(yàng)上(shàng)，再用(yòng)50mmX50mm的不(bù)影(yǐng)響病(bìng)毒活性(xìng)的(dí)塑料薄膜覆(fù)蓋，使(shǐ)試樣(yàng)與病毒(dú)懸液充分接觸(chù)。

3，接觸(chù)時間(jiān)

將樣(yàng)品瓶放(fàng)入培(péi)養箱，在25℃條件下培(péi)養(yǎng)2h。經(jīng)相關方協(xié)商確定後可(kě)調(tiáo)整(zhěng)接(jiē)觸時(shí)間(jiān)，但不(bù)超(chāo)過24h，並在(zài)試驗報(bào)告中注(zhù)明。

4，接種(zhǒng)後立即洗(xǐ)脫(tuō)病(bìng)毒

3個對照(zhào)樣試樣接種(zhǒng)病毒(dú)後，立即在(zài)樣品瓶中(zhōng)加入(rù)20mL的(dí)SCDLP液(yè)體(tǐ)培養(yǎng)基(jī)，然後將樣品瓶(píng)蓋上(shàng)瓶(píng)蓋(gài)，用旋渦(wō)混合器振蕩5次，每次5s，將病(bìng)毒從試(shì)樣中洗(xǐ)脫(tuō)下來。

注(zhù)
：該(gāi)病毒懸液(yè)將(jiāng)作為對照(zhào)試樣的(dí)初始(shǐ)洗脫(tuō)病毒(dú)懸(xuán)液。

5，接觸時間(jiān)後(hòu)洗脫病毒(dú)

3個對照樣試(shì)樣和3個抗(kàng)病毒試樣(yàng)接(jiē)觸2h後(hòu)，在樣品瓶中加入20ml的SCDIP液(yè)體培養基(jī)，然後蓋(gài)上瓶(píng)蓋，用旋(xuán)渦(wō)混合(hé)器(qì)振(zhèn)蕩5次，每(měi)次(cì)5s，將病(bìng)毒從試樣中(zhōng)洗(xǐ)脫(tuō)下來(lái)。

注(zhù)
：這些(xiē)病(bìng)毒(dú)懸液(yè)是(shì)與對照樣試樣和抗病毒(dú)試(shì)樣經接觸時間後(hòu)的初始洗(xǐ)脫(tuō)病(bìng)毒(dú)懸液(yè)。

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