高效液相色譜-串聯質譜(pǔ)法（HPLC-MS/MS）消毒(dú)劑(jì)殘留(liú)檢測技(jì)術研(yán)究(jiū)與應(yīng)用  

一，引言與(yǔ)法(fǎ)規(guī)依(yī)據  

消毒(dú)劑(jì)殘(cán)留檢測是保障食品接(jiē)觸表麵(miàn)，醫(yī)療環境及公共衛生安(ān)全(quán)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。高(gāo)效液(yè)相(xiāng)色(sè)譜(pǔ)-串聯(lián)質譜法（HPLC-MS/MS）憑借(jiè)高(gāo)靈敏度(dù)（檢(jiǎn)出限可達ng/L級）和(hé)高選擇性
，成(chéng)為復雜基(jī)質中(zhōng)痕(hén)量消(xiāo)毒(dú)劑(jì)及(jí)其降解(jiě)產物同(tóng)步(bù)分析(xī)的(dí)金標準(zhǔn)。2025年實施的(dí)GB14930.2-2025《食(shí)品安全(quán)國家標準(zhǔn)消毒劑》明確(què)要(yào)求：食(shí)品接觸(chù)表麵(miàn)過氧乙酸(suān)殘留≤0.5mg/L
，季銨(ǎn)鹽類≤0.1mg/kg
，且需(xū)采(cǎi)用HPLC-MS/MS法(fǎ)進行確證(zhèng)110。歐(ōu)盟EN14885標(biāo)準進(jìn)一步強調
，復(fù)合消毒(dú)劑(jì)需同步(bù)檢測降(jiàng)解產物(wù)（如過(guò)氧乙酸(suān)→乙酸）
，方(fāng)法驗證(zhèng)需涵(hán)蓋基(jī)質(zhì)效(xiào)應評估和穩(wěn)定(dìng)性(xìng)測試314。  

二(èr)，實驗(yàn)方法(fǎ)與(yǔ)優化(huà)  

（一）樣品(pǐn)前處理創新(xīn)  

1.復雜(zá)基(jī)質(zhì)處理(lǐ)  

針對(duì)禽肉(ròu)，乳(rǔ)製(zhì)品(pǐn)等高蛋白(bái)基(jī)質(zhì)
，采用QuEChERS結合(hé)固相萃取：  

提取(qǔ)：10g樣品+15mL乙腈(jīng)（含0.1%甲酸(suān)）
，渦(wō)旋(xuán)2min
，超(chāo)聲(shēng)提取15min；  

淨化：PrimeHLB固相(xiāng)萃取柱(zhù)（500mg/6mL）
，依(yī)次用5mL水(shuǐ)，5mL甲(jiǎ)醇活(huó)化
，上(shàng)樣後5mL水(shuǐ)-乙(yǐ)腈（9:1）淋洗
，5mL甲醇洗脫；  

濃(nóng)縮：40℃氮吹(chuī)至(zhì)幹
，1mL流(liú)動(dòng)相（0.1%甲酸(suān)水-乙腈=50:50）復溶
，過0.22μm濾(lǜ)膜(mó)4。  

2.揮發性(xìng)消毒(dú)劑衍(yǎn)生(shēng)化  

甲醛，戊(wù)二醛等醛(quán)類消毒劑采(cǎi)用2,4-二硝(xiāo)ji苯肼（DNPH）衍(yǎn)生(shēng)：  

衍生(shēng)條件(jiàn)：樣品(pǐn)中加(jiā)入(rù)100μLDNPH（10mg/mL）
，60℃水(shuǐ)浴(yù)30min
，生(shēng)成腙(zōng)類(lèi)衍生物(wù)；  

優勢(shì)：改善(shàn)色(sè)譜保留
，m/z211→152（甲醛(quán)-DNPH）
，檢(jiǎn)出(chū)限(xiàn)達0.01μg/L15。  

（二(èr)）色(sè)譜與質譜條(tiáo)件  

1.色(sè)譜分離(lí)  

色(sè)譜柱：WatersACQUITYUPLCHSST3（100mm×2.1mm
，1.8μm）；  

流動相(xiāng)：A相(xiāng)0.1%甲酸(suān)水
，B相(xiāng)乙(yǐ)腈(jīng)
，梯(tī)度洗(xǐ)脫(tuō)（0-3min：5%-95%B
，保持(chí)2min）；  

流速：0.3mL/min
，柱溫40℃
，進樣量(liáng)5μL412。  

2.質譜(pǔ)參數優化(huà)  

采(cǎi)用電噴(pēn)霧正(zhèng)離(lí)子(zǐ)模式(shì)（ESI+）
，多(duō)反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式定(dìng)量
，關鍵(jiàn)參數(shù)如下：  

消(xiāo)毒(dú)劑母離子（m/z）定量離子對（m/z）碰(pèng)撞能(néng)量（eV）LOD（μg/L）  

過(guò)氧(yǎng)乙酸7777→59150.05  

苯(běn)紮(zā)lv銨304304→166250.1  

甲醛-DNPH211211→152200.01  

氯己(jǐ)定506506→355300.08  

質譜(pǔ)條件：噴霧電壓(yā)3.5kV
，離子傳輸管溫度350℃
，鞘(qiào)氣流(liú)量11L/min
，輔(fǔ)助氣(qì)流量5L/min315。  

三，方法驗證與基(jī)質效應  

（一）方法學(xué)參數(shù)  

綫性(xìng)範圍(wéi)：0.5-100ng/mL
，相關係(xì)數(shù)r>0.999（以苯(běn)紮(zā)lv銨為例(lì)）；  

精(jīng)密度：日內(nèi)RSD<6%
，日間RSD<8%（n=6）；  

回收(shōu)率(shuài)：85%-115%（加(jiā)標水(shuǐ)平(píng)0.1-10μg/kg）；  

基質效應(yīng)：采(cǎi)用(yòng)同(tóng)位素(sù)內標（如苯紮lv銨-D8）校(xiào)正
，ME%控(kòng)製(zhì)在(zài)80%-120%414。  

（二）基(jī)質效(xiào)應消(xiāo)除策略  

基質匹配校準(zhǔn)：采用(yòng)空白樣品(pǐn)提(tí)取液配(pèi)製(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲(qū)綫
，抵(dǐ)消(xiāo)油脂(zhī)，蛋白質(zhì)對離(lí)子(zǐ)化的(dí)抑(yì)製(zhì)；  

色譜柱(zhù)選(xuǎn)擇：HSST3色(sè)譜柱（反(fǎn)相(xiāng)-親水混合(hé)模式(shì)）改善(shàn)極(jí)性消(xiāo)毒劑（如(rú)過(guò)氧(yǎng)乙酸）保(bǎo)留(liú)
，減少峰拖(tuō)尾(wěi)12。  

四(sì)，實際(jì)應用(yòng)案例  

（一）食品(pǐn)加(jiā)工(gōng)設(shè)備(bèi)檢(jiǎn)測  

某(mǒu)乳製品加工廠CIP係(xì)統消(xiāo)毒(dú)後(hòu)
，HPLC-MS/MS檢測(cè)結(jié)果(guǒ)：  

季銨(ǎn)鹽殘(cán)留：0.08mg/kg（限值(zhí)0.1mg/kg）；  

過氧(yǎng)乙(yǐ)酸(suān)殘(cán)留(liú)：未檢出（<0.05mg/L）
，符(fú)合(hé)GB14930.2-2025要(yào)求1015。  

（二(èr)）醫療表(biǎo)麵消毒驗證(zhèng)  

ICU病(bìng)床(chuáng)扶(fú)手采(cǎi)樣(yàng)後(hòu)檢測：  

氯(lǜ)己(jǐ)定殘(cán)留：0.03mg/m²（接(jiē)觸(chù)時間30min）；  

自然菌(jūn)殺(shā)滅率(shuài)：99.97%
，符合(hé)WS/T774-2021標(biāo)準16。  

五，新興趨(qū)勢與(yǔ)挑(tiāo)戰  

（一）復(fù)合(hé)消(xiāo)毒劑同步(bù)檢(jiǎn)測  

采用HILIC色譜柱（親水(shuǐ)作(zuò)用）分離EO與(yǔ)過(guò)氧(yǎng)乙酸
，MRM模(mó)式同時(shí)監(jiān)測m/z44（EO）和m/z77（過氧乙酸(suān)）
，解決共流(liú)出幹(gān)擾38。  

（二）現場(cháng)快(kuài)速(sù)檢測(cè)技術  

便攜式(shì)HPLC-MS/MS係統開發：  

微型化(huà)離(lí)子(zǐ)源(yuán)（Miniβ）
，檢測時間縮短(duǎn)至15分鐘；  

適用於突發公共衛生(shēng)事件的現場(cháng)篩查14。  

六，結論(lùn)  

HPLC-MS/MS法(fǎ)為消毒(dú)劑(jì)殘(cán)留檢測提(tí)供(gōng)了高(gāo)靈(líng)敏度(dù)和高(gāo)特(tè)異性(xìng)解(jiě)決方(fāng)案(àn)
，通過(guò)前處(chǔ)理(lǐ)優化(huà)（如QuEChERS-SPE聯(lián)用）和基質效(xiào)應校正(zhèng)
，可(kě)滿(mǎn)足(zú)GB14930.2-2025等最新國標(biāo)的(dí)嚴格(gé)要求。未(wèi)來(lái)需(xū)進(jìn)一(yī)步開發(fā)多(duō)組分同步分(fēn)析(xī)方法
，並推(tuī)動便攜式設(shè)備在(zài)現(xiàn)場(cháng)監測中的應用
，為食(shí)品安全和公(gōng)共(gòng)衛生防(fáng)控提供技術(shù)支撐。  

關鍵詞(cí)：HPLC-MS/MS；消毒劑殘(cán)留；基質效應；QuEChERS；國(guó)標GB14930.2-2025  

參(cān)考(kǎo)文(wén)獻(xiàn)  

[1]GB14930.2-2025食(shí)品安(ān)全國(guó)家標準消毒劑(jì).  

[2]鄧航(háng)等.PrimeHLBSPE結合HPLC-MS/MS測定羊(yáng)奶(nǎi)粉中(zhōng)6種(zhǒng)消(xiāo)毒劑(jì)殘(cán)留[J].現(xiàn)代食品科技,2025.  

[3]EPA.TestMethodsforMeasuringDisinfectantResidueLevelsonHardSurfaces[Z].2025.  

[4]中(zhōng)華人(rén)民共和國衛(wèi)生健康(kāng)委(wěi)員(yuán)會.消毒(dú)劑(jì)殘(cán)留檢(jiǎn)測方法指(zhǐ)南[S].2025.